Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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RbAp46 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405076
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RbAp46 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RbAp46, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RbAp46 Anticuerpo (E-9): sc-377197
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RbAp46 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405076 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RBBP7 codifica RbAp46, una proteína de unión a histonas con repeticiones WD40 que funciona como componente central de múltiples complejos reguladores de la cromatina, incluidos NuRD/HDAC, Sin3A y PRC2, y que se asocia con CAF-1 durante el ensamblaje de nucleosomas. A través de estas interacciones, RbAp46 ayuda a coordinar la desacetilación de histonas, la remodelación de la cromatina y el silenciamiento génico epigenético, influyendo en programas transcripcionales, en el ensamblaje de cromatina acoplado a la replicación del ADN y en la estabilidad del genoma. La regulación alterada de la cromatina dependiente de RBBP7 se ha vinculado con proliferación desregulada, defectos de diferenciación y fenotipos de respuesta al estrés observados tanto en cáncer como en enfermedades del desarrollo. Como factor nodal de la cromatina, RbAp46 se estudia con frecuencia en vías que controlan la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la transcripción específica de linaje.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RbAp46 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBBP7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBBP7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBBP7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RbAp46.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBBP7 para la investigación de la señalización de RbAp46, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RBBP7 críticos para la función de RbAp46
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBBP7 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RbAp46 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RbAp46 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBBP7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RbAp46 (h) y el plásmido HDR RbAp46 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBBP7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBBP7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.