RASAL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404999-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RASAL3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RASAL3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RASAL3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RASAL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RASAL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RASAL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RASAL3 codifica uma proteína ativadora de GTPase (GAP) de Ras que atenua a sinalização de Ras ao acelerar a hidrólise de GTP em pequenas GTPases da família Ras, restringindo assim a atividade a jusante das vias MAPK/ERK e PI3K–AKT. Em células da linhagem imune, RASAL3 está implicado no ajuste fino da sinalização proximal ao receptor de antígeno, influenciando limiares de ativação, proliferação e programas de diferenciação. Ao moldar respostas transcricionais e metabólicas dependentes de Ras, RASAL3 pode afetar respostas ao estresse celular e decisões de sobrevivência. O controlo desregulado da via de Ras é amplamente relevante em contextos de disfunção imunitária e de sinalização oncogénica, tornando RASAL3 um nó útil para estudos mecanísticos de transdução de sinal.
RASAL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RASAL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RASAL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RASAL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RASAL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.