Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rap1GAP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403721-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rap1GAPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rap1GAP (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rap1GAP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAP1GAP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rap1GAP Anticorpo (D-9): sc-166586
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rap1GAP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403721-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rap1GAP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403721-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAP1GAP codifica a proteína ativadora de GTPase Rap1 (Rap1GAP), um regulador negativo da pequena GTPase Rap1 que acelera a hidrólise de GTP para limitar a sinalização de Rap1. Ao modular vias dependentes de Rap1 que controlam a ativação de integrinas, a dinâmica das junções célula–célula e o remodelamento do citoesqueleto de actina, a Rap1GAP influencia a adesão, a migração e o comportamento celular polarizado. Alterações na expressão ou na atividade de RAP1GAP foram relatadas em múltiplos contextos de doença, nos quais a sinalização desregulada de Rap1 pode perturbar redes ligadas a MAPK/ERK e PI3K e remodelar interações com a matriz extracelular. Como um “freio” de sinalização na interface entre receptores de membrana e circuitos de GTPases a jusante, o RAP1GAP é frequentemente estudado para dissecar mecanismos de invasão, função de barreira e fenótipos do tipo metastático em sistemas modelo.
Rap1GAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAP1GAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAP1GAP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAP1GAP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAP1GAP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.