Date published: 2026-7-27

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Rap 2A CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403109

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Rap 2A CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在Rap 2A基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
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    Rap 2A CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-403109
    20 µg
    $397.00

    概述

    RAP2A 编码 Rap2A,这是一种与 Ras 相关的小型 GTP 酶,可在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间循环切换,从而调控细胞表面受体下游的信号转导。Rap2A 通过协调影响肌动蛋白动态与膜结构组织的多条通路(包括与 MAPK 信号及 Rho 家族 GTP 酶网络的串扰),参与细胞骨架重塑、囊泡运输和细胞黏附。由于其在控制细胞极性、迁移与增殖方面的作用,RAP2A 活性异常与多种疾病背景下观察到的生长失调和侵袭表型相关,包括癌症和炎症性疾病。因此,RAP2A 是用于解析小型 GTP 酶回路如何微调受体驱动信号与细胞可塑性的一个有价值节点。

    Rap 2A CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中RAP2A基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对RAP2A基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏RAP2A开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使Rap 2A蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建RAP2A缺失的细胞模型,用于Rap 2A信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 Rap 2A 功能至关重要的 RAP2A 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 RAP2A 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 Rap 2A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Rap 2A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 RAP2A 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 Rap 2A HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 Rap 2A HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由RAP2A同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定RAP2A靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。