RANTES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422845-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RANTES O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RANTES, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RANTES Anticorpo (A-4): sc-365826
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RANTES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-422845-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ccl5 de camundongo codifica a RANTES (CCL5), uma quimiocina secretada por linfócitos T ativados, células NK, macrófagos e plaquetas, que direciona o tráfego de leucócitos por meio da sinalização via CCR1, CCR3 e CCR5. A quimiotaxia induzida por RANTES molda o recrutamento de células inflamatórias, promove interações entre células imunes e endotélio e coordena redes de citocinas que influenciam a remodelação tecidual e respostas antivirais. A atividade de Ccl5/RANTES se cruza com programas associados a NF-κB e interferons e pode modular a polarização mieloide e a localização de linfócitos efetores. A desregulação da sinalização de Ccl5 tem sido implicada em modelos murinos de inflamação crônica e autoimunidade, neuroinflamação, inflamação metabólica e na dinâmica do microambiente tumoral-imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RANTES (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RANTES.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl5 para a investigação da sinalização de RANTES, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl5 críticos para a função RANTES
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RANTES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RANTES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RANTES Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RANTES (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.