Rak Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405590-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RakO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rak (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rak (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FRK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rak Anticorpo (H-12): sc-166478
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rak Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405590-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rak Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405590-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O FRK humano codifica a tirosina quinase não receptora Rak, uma enzima relacionada à família Src, enriquecida em contextos epiteliais, que modula a sinalização proveniente de receptores de fatores de crescimento e de complexos de adesão célula–célula. Rak participa do controle dependente de fosforilação da dinâmica do citoesqueleto, da progressão do ciclo celular e de programas de diferenciação por meio de vias que se cruzam com a sinalização EGFR/ErbB, a sinalização de adesões focais e a regulação de junções. Alterações na atividade ou na expressão de FRK têm sido associadas à proliferação desregulada e à homeostase epitelial, tornando-o relevante para estudos de biologia tumoral, invasão e sinalização específica de linhagem. Como uma quinase com efeitos dependentes do contexto sobre crescimento e motilidade, Rak é frequentemente investigada para mapear redes de fosforilação e mecanismos de controle por retroalimentação em sinalização induzida por estresse e por receptores.
Rak O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FRK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FRK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FRK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FRK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.