Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RADX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409991
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RADX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RADX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RADX Anticorpo (A-3): sc-514563
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RADX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409991 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CXorf57 codifica a RADX, um fator de ligação ao DNA de fita simples que modula a dinâmica das forquilhas de replicação e ajuda a manter a estabilidade do genoma durante a fase S. A RADX antagoniza o carregamento de RAD51 em forquilhas de replicação estagnadas, moldando a recombinação homóloga e coordenando respostas ao estresse replicativo. Por meio dessas funções, contribui para a preservação da integridade das forquilhas de replicação, a supressão de recombinação aberrante e o controle de vias de sinalização de dano ao DNA. A desregulação do equilíbrio entre proteção da forquilha e reparo associado à RADX é relevante para mecanismos subjacentes aos fenótipos de instabilidade genômica observados na biologia do câncer e em outros modelos de doenças associados ao estresse replicativo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RADX (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CXorf57 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CXorf57, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CXorf57 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RADX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CXorf57 para a investigação da sinalização de RADX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CXorf57 críticos para a função RADX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CXorf57 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RADX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RADX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CXorf57. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RADX Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RADX (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CXorf57 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CXorf57 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.