RACK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411774
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RACK7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RACK7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RACK7 Anticorpo (RF-9): sc-100824
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RACK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-411774 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ZMYND8 (RACK7) codifica um leitor de cromatina que se liga a histonas acetiladas e metiladas por meio do seu módulo PHD–bromodomínio–PWWP para coordenar a regulação transcricional. O RACK7 participa de programas de remodelamento da cromatina e de resposta a danos no DNA, integrando sinais de modificações de histonas para modular a atividade de enhancers e a transcrição dependente da RNA polimerase II. Ele tem sido associado à regulação da transição epitélio–mesênquima, a redes transcricionais ligadas à hipóxia e ao controle da expressão de genes inflamatórios por meio de interações com complexos correpressores e de remodelamento. A desregulação de vias de cromatina associadas ao ZMYND8 foi relatada no câncer e em outros distúrbios caracterizados por estabilidade genômica e controle transcricional alterados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RACK7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZMYND8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZMYND8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZMYND8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RACK7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZMYND8 para a investigação da sinalização de RACK7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZMYND8 críticos para a função RACK7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZMYND8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RACK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RACK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZMYND8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RACK7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RACK7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZMYND8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZMYND8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.