Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RACK1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420608-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RACK1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RACK1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RACK1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rack1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RACK1 Anticorpo (B-3): sc-17754
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RACK1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420608-NIC | 20 µg | $410.00 |
Rack1 codifica o receptor para a proteína quinase C ativada 1 (RACK1), uma proteína estrutural conservada com repetições WD40 que organiza complexos de sinalização multiproteicos e liga entradas de receptores a vias de quinases a jusante. Em células de camundongo, a RACK1 associa-se a isoformas de PKC e integra a sinalização via MAPK/ERK, quinases da família Src e redes relacionadas à PI3K, além de atuar na subunidade ribossomal 40S para modular a iniciação da tradução e a síntese de proteínas responsiva ao estresse. Por meio dessas funções, a RACK1 influencia a adesão celular, a polaridade, a migração e a progressão do ciclo celular, coordenando vias de adesão focal e de remodelamento do citoesqueleto. A desregulação da sinalização dependente de RACK1 e do controle translacional tem sido associada a estados de sinalização oncogênica, circuitos de sinalização inflamatória e respostas alteradas ao estresse celular, tornando-a um alvo frequente de estudos mecanísticos.
RACK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rack1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rack1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rack1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rack1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.