Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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rabphilin-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404628
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- rabphilin-3A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico rabphilin-3A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:rabphilin-3A Anticorpo (D-6): sc-393197
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
rabphilin-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404628 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RPH3A codifica a rabfilina-3A, um efetor de Rab3A/Rab27 enriquecido em neurónios que liga a sinalização dependente de Ca²⁺ à exocitose regulada de vesículas. Por meio de interações com pequenas GTPases e componentes de vesículas sinápticas, a rabfilina-3A contribui para a ancoragem (docking) e a preparação (priming) das vesículas, bem como para a probabilidade de libertação, sustentando uma secreção eficiente de neurotransmissores. A sua atividade cruza-se com vias de tráfego de membrana pré-sináptica e com a dinâmica do citoesqueleto que coordenam a reciclagem de vesículas e a plasticidade sináptica. A desregulação do transporte de vesículas sinápticas e da maquinaria de libertação envolvendo RPH3A é relevante para estudos mecanísticos da biologia de doenças neurológicas e neuropsiquiátricas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO rabphilin-3A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPH3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPH3A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPH3A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína rabphilin-3A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPH3A para a investigação da sinalização de rabphilin-3A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPH3A críticos para a função rabphilin-3A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPH3A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo rabphilin-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo rabphilin-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPH3A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo rabphilin-3A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR rabphilin-3A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPH3A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPH3A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.