Rab GDI α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404659-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab GDI αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab GDI α (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rab GDI α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GDI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab GDI α Anticorpo (C-7): sc-271846
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab GDI α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404659-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab GDI α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404659-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GDI1 codifica o inibidor de dissociação de GDP de Rab alfa (Rab GDI α), um regulador citosólico que se liga a GTPases Rab preniladas e controla a sua extração das membranas, solubilização e entrega a compartimentos-alvo durante o tráfego vesicular. Ao modular o ciclo das Rab entre pools associados à membrana e ao citosol, o Rab GDI α ajuda a coordenar o transporte endocítico e exocítico, a identidade das organelas e a dinâmica de membranas em vias como o transporte de endossomo para Golgi e a reciclagem de vesículas sinápticas. O funcionamento adequado de GDI1 sustenta as exigências de tráfego neuronal, e a regulação alterada do transporte dependente de Rab tem sido associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e cognitivos. Em sistemas humanos, GDI1 é frequentemente estudado como um nó que conecta a sinalização de GTPases Rab à proteostase, ao turnover de recetores de membrana e à fidelidade do transporte específico de compartimento.
Rab GDI α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GDI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GDI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GDI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GDI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.