Rab 27b Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403498-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 27bO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 27b (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 27b (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAB27B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 27b Anticorpo (1596CT245.254.49): sc-517602
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 27b Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403498-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab 27b Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403498-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O RAB27B codifica a pequena GTPase Rab 27b, um regulador-chave do tráfego vesicular que coordena a ancoragem (docking) e a fusão de grânulos secretórios e exossomos na membrana plasmática. A Rab 27b funciona por meio do ciclo entre os estados ligados a GDP e a GTP e interage com redes de efetores envolvidas na remodelação do citoesqueleto, na dinâmica de membranas e na exocitose regulada. Em células humanas, o tráfego dependente de RAB27B influencia programas de secreção relevantes para a sinalização imune e inflamatória, a liberação de grânulos de plaquetas e neutrófilos e a comunicação tumor–estroma via vesículas extracelulares. A expressão ou atividade desregulada de RAB27B tem sido associada a fenótipos alterados de secreção vesicular observados na progressão do câncer e no comportamento metastático, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas sobre transporte de membrana.
Rab 27b O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAB27B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAB27B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAB27B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAB27B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.