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Rab 26CRISPR激活质粒(h) | sc-411810-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Rab 26CRISPR激活质粒(h2) | sc-411810-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
RAB26 编码 Rab 26,这是一种 Rab 家族的小型 GTP 酶,通过协调囊泡出芽、运输与融合等事件来调控膜运输。Rab 26 与分泌以及内体-溶酶体相关过程有关,包括引导货物经由回收与降解通路进行分选,以及在特定细胞类型中调节囊泡动力学。通过影响转运机器的空间组织与细胞区室身份,RAB26 可改变信号输出并影响细胞稳态。Rab GTP 酶依赖的转运失调与神经退行性表型、癌细胞行为以及免疫功能障碍相关,因此 RAB26 是在疾病相关模型中研究通路扰动的一个重要节点。
Rab 26 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性RAB26的表达。
Rab 26 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的RAB26基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于RAB26转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Rab 26表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的RAB26位点,并能够研究内源性位点上依赖于Rab 26的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在RAB26表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Rab 26通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。