Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Rab 14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427035
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 14 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rab 14, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 14 Anticorpo (D-5): sc-271401
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427035 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Rab14 codifica a Rab14, uma pequena GTPase que regula o tráfego vesicular entre endossomos, o aparelho de Golgi e a membrana plasmática, coordenando a triagem de cargas e a reciclagem de membranas. Rab14 participa de processos de reciclagem endocítica e de transporte secretório que moldam a disponibilidade de receptores, a localização de transportadores de nutrientes e a dinâmica de membranas. Por meio de seus papéis na maturação de endossomos e na organização de nós de tráfego, Rab14 influencia vias ligadas à polaridade celular, à citocinese e à regulação metabólica. A desregulação do tráfego dependente de Rab14 tem sido associada, em sistemas experimentais, a fenótipos relevantes para sinalização oncogênica, transporte responsivo à insulina e remodelamento de vacúolos contendo patógenos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rab 14 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rab14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rab14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rab14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rab 14.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rab14 para a investigação da sinalização de Rab 14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rab14 críticos para a função Rab 14
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rab14 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rab 14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Rab 14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rab14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rab 14 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Rab 14 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rab14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rab14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.