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R7BP慢病毒激活颗粒(h) | sc-415971-LAC | 200 µl | $455.00 |
RGS7BP 编码 R7BP,这是一种膜锚定及调控伙伴蛋白,隶属于 RGS7 家族 GTP 酶激活蛋白(GAP)的相互作用网络,可在神经元及其他兴奋性细胞中塑造 GPCR 信号的幅度与动力学特征。通过促进 RGS7–Gβ5 复合体在质膜上的定位与稳定性,R7BP 影响 Gi/o 偶联通路及其下游对 cAMP、离子通道活性和突触传递的调控。这种支架样作用使 RGS7BP 与多种神经生理过程相关,包括信号终止与受体去敏化;在 GPCR 网络调控受扰的神经系统与神经精神表型研究中也具有意义。RGS7BP 依赖的区室化发生改变,还可能影响调控细胞兴奋性与适应性反应的信号串扰。
R7BP 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RGS7BP 表达。
R7BP 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在RGS7BP转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性R7BP表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 RGS7BP 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。