R-Spondin3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2): sc-428439-NIC-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- R-Spondin3O plasmídeo de dupla Nickase (m2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase R-Spondin3 (m2) e o Plasmídeo Double Nickase R-Spondin3 (m22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rspo3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
R-Spondin3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428439-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Rspo3 do camundongo codifica a R‑Spondina 3 (R‑Spondin3), um ligante matricelular secretado que potencializa a sinalização canônica WNT/β‑catenina ao se ligar a receptores LGR e neutralizar o complexo de ligases de ubiquitina ZNRF3/RNF43, estabilizando os receptores Frizzled/LRP na superfície celular. Ele desempenha papéis centrais na morfogênese embrionária, no desenvolvimento vascular, no padronamento tecidual e na manutenção de células‑tronco/progenitoras, integrando sinais da matriz extracelular para moldar programas epitélio‑mesenquimais e angiogênicos. A atividade desregulada do eixo RSPO3–WNT tem sido implicada em organogênese anômala e em remodelamento patológico de tecidos, inclusive em contextos associados à tumorigênese e à fibrose. Assim, Rspo3 é amplamente utilizado em modelos murinos e em sistemas in vitro para investigar a regulação da via WNT, a sinalização do nicho e redes gênicas do desenvolvimento por meio de edição genômica, ensaios com repórteres e estudos com organoides ou de diferenciação endotelial.
R-Spondin3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rspo3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rspo3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rspo3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rspo3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.