PYST2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404642-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PYST2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PYST2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PYST2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DUSP7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PYST2 Anticorpo (D-8): sc-377106
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PYST2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PYST2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A fosfatase de dupla especificidade 7 (DUSP7), também conhecida como PYST2, é uma fosfatase direcionada a MAPK que desfosforila e inativa preferencialmente ERK1/2, moldando a amplitude e a duração da sinalização induzida por mitógenos. Ao fornecer retroalimentação negativa dentro da cascata Ras–Raf–MEK–ERK, a DUSP7 ajuda a regular proliferação, diferenciação e programas transcricionais adaptativos ao estresse. Alterações na expressão ou na atividade de DUSP7 têm sido associadas a uma saída desregulada da via MAPK em cânceres e em outras condições nas quais a sinalização por ERK governa decisões de destino celular, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos da plasticidade de sinalização. Em modelos de células humanas, investigar a função de DUSP7 pode esclarecer como a atenuação mediada por fosfatases influencia efetores a jusante, incluindo genes de resposta imediata e reguladores do ciclo celular.
PYST2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DUSP7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DUSP7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DUSP7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DUSP7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.