Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Pyrin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403193-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PyrinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Pyrin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Pyrin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MEFV. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pyrin Anticorpo (C-11): sc-390938
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pyrin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403193-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Pyrin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MEFV codifica a pirina, um sensor imune inato enriquecido em células mieloides que regula a sinalização do inflamassoma e a ativação de caspases inflamatórias em resposta a sinais relacionados ao citoesqueleto e à modulação de GTPases da família Rho. A pirina ajuda a coordenar a montagem, dependente de ASC, de complexos de inflamassoma, influenciando a maturação de citocinas da família IL-1 e vias piroptóticas que moldam a inflamação conduzida por neutrófilos. A atividade desregulada do MEFV ou suas variantes está associada a fenótipos autoinflamatórios e a alterações nos limiares de resposta da imunidade inata, tornando esse locus útil para dissecar redes de sinalização inflamatória. Em sistemas celulares humanos, a perturbação de MEFV é comumente usada para estudar a regulação do inflamassoma, o processamento de citocinas e a comunicação cruzada entre a dinâmica do citoesqueleto e o reconhecimento pela imunidade inata.
Pyrin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MEFV em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MEFV. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MEFV. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MEFV interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.