Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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pyridoxal phosphatase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406810
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- pyridoxal phosphatase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico pyridoxal phosphatase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:pyridoxal phosphatase Anticorpo (F-2): sc-271379
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
pyridoxal phosphatase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406810 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PDXP codifica a fosfatase de piridoxal, uma enzima citosólica que hidrolisa o fosfato de piridoxal 5′ (PLP), a forma ativa da vitamina B6, contribuindo assim para o controle celular da disponibilidade de PLP e para a homeostase dos vitâmeros de B6. Como o PLP é um cofator essencial para numerosas aminotransferases, descarboxilases e enzimas envolvidas no metabolismo de um carbono e em vias relacionadas a neurotransmissores, a atividade de PDXP pode influenciar indiretamente o turnover de aminoácidos e fluxos metabólicos mais amplos. Por seu papel na manutenção do equilíbrio de cofatores, PDXP é relevante para estudos de adaptação metabólica, vias ligadas ao estado redox e regulação enzima–cofator. Alterações no metabolismo dependente de PLP têm sido implicadas em diversos contextos relevantes para doenças, tornando PDXP um alvo útil para investigações mecanísticas de fenótipos celulares associados ao metabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO pyridoxal phosphatase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDXP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDXP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDXP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína pyridoxal phosphatase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDXP para a investigação da sinalização de pyridoxal phosphatase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDXP críticos para a função pyridoxal phosphatase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDXP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo pyridoxal phosphatase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo pyridoxal phosphatase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDXP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo pyridoxal phosphatase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR pyridoxal phosphatase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDXP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDXP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.