Pumilio 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406309
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pumilio 1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pumilio 1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pumilio 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406309 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PUM1 codifica a Pumilio 1, uma proteína conservada de ligação a RNA que reconhece elementos de resposta a Pumilio (PREs) nas regiões 3′ UTR para regular a estabilidade, a localização e a tradução de mRNAs. Ao montar complexos regulatórios pós-transcricionais, a PUM1 molda programas de expressão génica que controlam a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a remodelação do transcriptoma em resposta ao stress. A Pumilio 1 participa em vias do metabolismo de RNA, incluindo repressão translacional, degradação de mRNA e coordenação com a regulação mediada por microRNAs. A atividade desregulada de PUM1 tem sido associada a alterações na proteostase e em programas de manutenção do genoma, e tem sido estudada no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, bem como de redes de regulação de RNA associadas ao cancro.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pumilio 1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PUM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PUM1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PUM1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pumilio 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PUM1 para a investigação da sinalização de Pumilio 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PUM1 críticos para a função Pumilio 1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PUM1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pumilio 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pumilio 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PUM1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pumilio 1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pumilio 1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PUM1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PUM1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.