PTPMT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403905

概要

PTPMT1はミトコンドリアに局在するタンパク質チロシンホスファターゼをコードしており、ホスファチジルグリセロールリン酸を脱リン酸化することでカルジオリピン生合成およびミトコンドリア内膜の完全性を支持します。カルジオリピン依存的な呼吸鎖スーパーコンプレックスの組織化を調節することにより、PTPMT1は酸化的リン酸化、ミトコンドリアのダイナミクス、ならびに細胞のエネルギー恒常性に影響を与えます。その活性は、脂質リモデリングやミトコンドリアのストレス応答経路と交差し、代謝要求の高い細胞における増殖と生存を左右します。PTPMT1に関連するミトコンドリア脂質代謝の制御異常は、バイオエネルゲティクスやレドックスバランスの変化と関連づけられており、代謝適応やミトコンドリア機能不全の研究において重要です。

PTPMT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPTPMT1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PTPMT1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PTPMT1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PTPMT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PTPMT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PTPMT1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PTPMT1の機能に不可欠なPTPMT1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PTPMT1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PTPMT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPTPMT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PTPMT1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PTPMT1 HDRプラスミド（h）および PTPMT1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPTPMT1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPTPMT1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。