PTP1B Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422502-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTP1BO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PTP1B (m) e o Plasmídeo Double Nickase PTP1B (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ptpn1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PTP1B Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422502-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Ptpn1** de camundongo codifica a **proteína tirosina fosfatase 1B (PTP1B)**, uma fosfatase associada ao retículo endoplasmático (RE) que desfosforila receptores tirosina-quinase e intermediários-chave de sinalização para limitar as respostas a fatores de crescimento e citocinas. A PTP1B é um regulador negativo central da sinalização dos receptores de insulina e de leptina, modulando a dinâmica das vias **PI3K–AKT** e **MAPK** e a expressão gênica metabólica a jusante. Por meio da modulação de **JAK/STAT** e dos estados de fosforilação de receptores, a PTP1B influencia a sinalização inflamatória, a adesão celular e as respostas ao estresse. A atividade desregulada de **Ptpn1/PTP1B** é amplamente estudada no contexto de resistência à insulina, disfunção metabólica associada à obesidade e reprogramação de sinalização relevante para o câncer, sustentando seu uso na dissecação de vias e em estudos de genótipo–fenótipo em modelos murinos.
PTP1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ptpn1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ptpn1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ptpn1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ptpn1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.