Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422498-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTN O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PTN, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PTN Anticorpo (H-6): sc-74443
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PTN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-422498-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ptn codifica a pleiotrofina (PTN), um fator de crescimento secretado com afinidade por heparina que modula a comunicação célula–célula e célula–matriz durante o desenvolvimento e o remodelamento tecidual. A PTN sinaliza por meio de interações com fosfatases de tirosina de proteínas receptoras e outros parceiros de superfície, influenciando cascatas de fosforilação, o crescimento de neuritos, a migração celular e programas de sobrevivência, incluindo processos ligados às vias MAPK/ERK e PI3K/AKT. Em modelos murinos, a PTN está implicada no padrão do neurodesenvolvimento, em respostas angiogênicas e na regulação de microambientes inflamatórios, com expressão alterada relatada em diferentes contextos de lesão e de sinalização proliferativa. Essas funções tornam Ptn um nó útil para dissecar entradas extracelulares de fatores de crescimento que moldam o comportamento de linhagens, a conectividade sináptica e a comunicação entre estroma e sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PTN (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ptn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ptn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ptn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PTN.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ptn para a investigação da sinalização de PTN, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ptn críticos para a função PTN
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ptn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PTN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PTN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ptn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PTN Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PTN (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ptn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ptn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.