Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTEN Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422475-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTENO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PTEN (m) e o Plasmídeo Double Nickase PTEN (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pten. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PTEN Anticorpo (A2B1): sc-7974
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PTEN Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422475-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PTEN Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422475-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Pten** de camundongo codifica o **PTEN**, uma fosfatase de lipídios e proteínas que antagoniza a sinalização de **PI3K** ao desfosforilar **PIP3** para **PIP2**, restringindo assim a atividade da via **AKT/mTOR**. Por meio dessa função, o PTEN regula crescimento celular, sobrevivência, proliferação, migração e a homeostase metabólica, além de influenciar a estabilidade do genoma e as respostas a danos no DNA. A perturbação da sinalização dependente de PTEN é amplamente utilizada para modelar sinalização desregulada por fatores de crescimento e programas alterados de diferenciação celular em sistemas de mamíferos. Na biologia do camundongo, **Pten** é frequentemente estudado em contextos como desenvolvimento tecidual, regulação imunológica e função neuronal, nos quais a intensidade da sinalização **PI3K–AKT** é um determinante-chave do fenótipo.
PTEN O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pten em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pten. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pten. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pten interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.