PSK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-418247-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PSK2O plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PSK2 (h2) e o Plasmídeo Double Nickase PSK2 (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TAOK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PSK2 Anticorpo (22): sc-136094
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PSK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418247-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A TAOK1 humana (TAO kinase 1), também referida como PSK2, codifica uma quinase de serina/treonina que atua a montante da sinalização MAPK, particularmente das cascatas p38 e JNK ativadas por estresse, para coordenar a dinâmica do citoesqueleto, a organização do centrossomo e processos dependentes de microtúbulos importantes para a mitose e o desenvolvimento neuronal. A atividade de TAOK1 integra sinais de estresse celular e de vias de polaridade, influenciando redes de fosforilação que regulam apoptose, migração e crescimento de neuritos. Estudos genéticos e funcionais têm implicado a desregulação de TAOK1 em fenótipos do neurodesenvolvimento e em reprogramação de sinalização associada ao câncer, sustentando sua relevância para modelos de controle alterado de MAPK e de comportamento celular dirigido pelo citoesqueleto. A edição gênica de TAOK1 permite investigar mecanisticamente a comunicação cruzada entre vias dependentes de quinases, mapear substratos de fosforilação e gerar sistemas de células humanas isogênicas para estudar relações genótipo–fenótipo em contextos relevantes para doenças.
PSK2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TAOK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TAOK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TAOK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TAOK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.