PSIP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404589

概要

PSIP1（LEDGF/p75としても知られる）はクロマチン結合性の転写コファクターであり、PWWPドメインを介してH3K36me3で標識された活性遺伝子に結合し、転写伸長、RNAプロセシング、DNA損傷応答の制御に寄与します。複製ストレスや二本鎖切断（DSB）修復に関わる因子と相互作用することで、PSIP1は遺伝毒性条件下におけるゲノム安定性と細胞生存を支えます。また、ウイルスインテグラーゼをクロマチンに係留して組込み部位の選択に影響を与えることでも知られ、がん遺伝子性の転写や細胞ストレスシグナルに関連する制御プログラムにも関与します。PSIP1に関連するクロマチン相互作用の破綻は、転写制御や修復経路のバランスが変化する血液悪性腫瘍をはじめとする各種がんの文脈で研究されています。

PSIP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPSIP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PSIP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PSIP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PSIP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PSIP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PSIP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PSIP1の機能に不可欠なPSIP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PSIP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PSIP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPSIP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PSIP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PSIP1 HDRプラスミド（h）および PSIP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPSIP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPSIP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。