PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400448

Visão geral

KLK3 codifica a peptidase 3 relacionada às calicreínas (PSA), uma protease serina secretada produzida predominantemente por células epiteliais luminais da próstata e liberada no fluido seminal. O PSA participa do processamento proteolítico de proteínas do plasma seminal e contribui para redes extracelulares de proteases que modulam a clivagem de substratos, a renovação proteica e a sinalização do microambiente. Sua expressão é fortemente regulada pela sinalização do receptor de andrógeno, vinculando a transcrição de KLK3 ao controle hormonal da diferenciação do epitélio prostático e de programas secretórios. A desregulação da expressão de KLK3 e a atividade alterada do PSA estão intimamente associadas à patobiologia da próstata e são amplamente utilizadas como leituras moleculares em estudos de resposta a andrógenos, progressão tumoral e remodelamento do microambiente.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLK3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLK3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLK3 para a investigação da sinalização de PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLK3 críticos para a função PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLK3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLK3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLK3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLK3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.