PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436837
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRRG1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRRG1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436837 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Prrg1 de camundongo codifica a PRRG1, uma proteína transmembrana rica em prolina com um domínio de γ-carboxiglutamato (Gla), o que sugere funções em interações proteicas dependentes de cálcio na superfície celular. A PRRG1 está implicada em sinalização associada à adesão e em processos regulatórios próximos à membrana que podem influenciar a organização do citoesqueleto, o tráfego de receptores e a comunicação entre a matriz extracelular e vias intracelulares. Padrões de expressão e associações relatadas conectam a PRRG1 a programas de diferenciação celular e à homeostase específica de tecidos, tornando-a relevante para estudos de perturbações de sinalização em contextos de desenvolvimento e de doença. A dissecação da função de PRRG1 pode ajudar a esclarecer como proteínas com domínio Gla modulam microambientes locais de sinalização e respostas transcricionais a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRRG1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prrg1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prrg1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prrg1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRRG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prrg1 para a investigação da sinalização de PRRG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prrg1 críticos para a função PRRG1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prrg1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prrg1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRRG1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRRG1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prrg1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prrg1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.