PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416703

Visão geral

PRRG1 (proline rich and Gla domain 1) codifica uma proteína transmembranar caracterizada por um domínio extracelular de ácido γ-carboxiglutâmico (Gla) e por uma região citoplasmática rica em prolina, compatível com funções de interação proteína–proteína e de plataforma (scaffold) de sinalização. Embora os seus papéis mecanísticos permaneçam incompletamente definidos, a PRRG1 tem sido associada à regulação da comunicação célula–célula e de redes de sinalização associadas a recetores, que influenciam a adesão, a organização do citoesqueleto e programas de diferenciação celular dependentes do contexto. Alterações de expressão foram descritas em múltiplos contextos biológicos, apoiando o uso da PRRG1 como alvo para investigar a remodelação de vias em modelos relevantes para doenças. A investigação funcional de PRRG1 pode ajudar a esclarecer como proteínas de membrana com domínio Gla contribuem para a integração da sinalização e para a estabilidade fenotípica em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRRG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PRRG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PRRG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PRRG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRRG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PRRG1 para a investigação da sinalização de PRRG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PRRG1 críticos para a função PRRG1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PRRG1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PRRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PRRG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PRRG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PRRG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PRRG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PRRG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.