PRMT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406688

概要

PRMT3はI型のタンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼをコードしており、タンパク質基質のアルギニン残基に非対称ジメチル化を触媒します。これにより、タンパク質間相互作用やRNA代謝の翻訳後制御に寄与します。PRMT3は主に細胞質に局在し、リボソームタンパク質のメチル化などを介してリボソーム生合成と翻訳の制御に関与することが示されており、その結果、プロテオスタシスや細胞増殖プログラムに影響を与えます。シグナル伝達経路やストレス応答経路とのクロストークを通じて、PRMT3活性は翻訳制御やリボ核タンパク質複合体の組み立てを介し、間接的に遺伝子発現の出力を形成し得ます。アルギニンメチル化の破綻やPRMTファミリー活性の変化は、がん関連の表現型や、異常なRNAプロセシングおよびタンパク質合成を伴う他の疾患としばしば関連しています。

PRMT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPRMT3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRMT3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRMT3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRMT3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRMT3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRMT3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRMT3の機能に不可欠なPRMT3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRMT3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRMT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRMT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRMT3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRMT3 HDRプラスミド（h）および PRMT3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRMT3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRMT3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。