PRMT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420951

概要

Prmt2 は、プロテインアルギニンメチルトランスフェラーゼ2（PRMT2）をコードしており、PRMT2 はI型PRMTとして、ヒストンおよび非ヒストン基質上のアルギニン残基に非対称ジメチル化を触媒し、クロマチン構造やタンパク質機能を調節します。PRMT2 活性は、核内受容体を含む各種シグナル伝達経路における転写制御やコレギュレーターの動態に影響を与え、アルギニンメチル化を状況依存的な遺伝子発現プログラムと結び付けます。マウス系では、PRMT2 はエピジェネティック機構および翻訳後修飾を介して、細胞増殖、分化、炎症関連遺伝子の制御に関与することが示されています。PRMT2 依存的なメチル化や転写ネットワークの破綻は、腫瘍関連シグナル、代謝ストレス応答、免疫調節異常などの疾患に関わるプロセスに関連付けられており、経路研究における機構的な要所（ノード）としての有用性が支持されています。

PRMT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPrmt2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Prmt2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Prmt2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRMT2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRMT2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Prmt2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRMT2の機能に不可欠なPrmt2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Prmt2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRMT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPRMT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Prmt2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRMT2 HDRプラスミド（m）および PRMT2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPrmt2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPrmt2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。