PRIC285 Double Nickaseプラスミド (h): sc-406441-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- PRIC285 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- PRIC285ダブルニカースプラスミド（h）およびPRIC285ダブルニカースプラスミド（h2）は、HELZ2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
PRIC285 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-406441-NIC | 20 µg | $410.00 |
HELZ2（PRIC285としても報告） は、ヘリカーゼ様の転写共役因子をコードしており、核内受容体シグナルを、脂質の取り扱いおよび炎症応答を制御する遺伝子発現プログラムへと結び付ける役割に関与しています。PPAR などの受容体や関連する代謝制御因子の下流における転写制御に参加し、脂肪細胞分化、インスリン感受性、自然免疫シグナル伝達に関連する経路に影響を与えます。HELZ2/PRIC285 活性の変化は、代謝恒常性の破綻や炎症性表現型と関連づけられており、代謝と転写制御をつなぐ機構的ハブとして位置付けられます。これらの機能により、HELZ2 は肝細胞、脂肪細胞、免疫系由来細胞モデルにおける遺伝子制御ネットワークの研究に適した標的となります。
PRIC285 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HELZ2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HELZ2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HELZ2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HELZ2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。