PRIC285 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406441

概要

HELZ2はPRIC285をコードしており、PRIC285は核内受容体の共活性化およびクロマチン関連RNA代謝を介した転写調節に関与すると考えられている、ヘリカーゼ様因子です。PRIC285は、PPARや関連経路によって制御される代謝遺伝子プログラムと関連づけられており、脂質恒常性、ミトコンドリア機能、炎症シグナル伝達とのつながりが示されています。HELZ2活性の変化は、代謝調節異常や腫瘍に伴う転写リモデリングの文脈で報告されており、遺伝子制御ネットワークや細胞状態遷移の研究において重要です。核内で機能するという特性から、HELZ2はヒト細胞における転写、RNAプロセシング、ストレス応答プログラム間の経路クロストークを解析するための有用な結節点（ノード）となります。

PRIC285 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHELZ2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HELZ2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HELZ2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRIC285タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRIC285シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HELZ2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRIC285の機能に不可欠なHELZ2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HELZ2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRIC285 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRIC285 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HELZ2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRIC285 HDRプラスミド（h）および PRIC285 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHELZ2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHELZ2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。