Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
prefoldin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423658
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- prefoldin 3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico prefoldin 3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:prefoldin 3 Anticorpo (D-5): sc-390524
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
prefoldin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423658 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vbp1 codifica a prefoldina 3, um componente cochaperona da maquinaria do tipo prefoldina que sustenta a homeostase proteica citosólica ao auxiliar o dobramento e a estabilização de proteínas clientes selecionadas. A prefoldina 3 contribui para redes de proteostase ligadas à organização do citoesqueleto, à montagem de complexos macromoleculares e à coordenação com vias de chaperonas que limitam o dobramento incorreto de proteínas sob estresse celular. Por meio desses processos, a atividade de Vbp1 pode influenciar a progressão do ciclo celular, a adaptação ao estresse e o equilíbrio entre o dobramento e a degradação de proteínas. A desregulação de vias associadas a chaperonas é relevante em modelos de estresse proteotóxico e neurodegeneração, nos quais a capacidade de dobramento alterada e o controle de qualidade podem modificar fenótipos associados à doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO prefoldin 3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vbp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vbp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vbp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína prefoldin 3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vbp1 para a investigação da sinalização de prefoldin 3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vbp1 críticos para a função prefoldin 3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vbp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo prefoldin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo prefoldin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vbp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo prefoldin 3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR prefoldin 3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vbp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vbp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.