Prealbumin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401083

Visão geral

O TTR humano codifica a prealbumina (transtirretina), uma proteína carreadora tetramérica secretada que transporta tiroxina (T4) e retinol por meio da ligação à proteína ligadora de retinol, dando suporte à distribuição de hormônios endócrinos e à homeostase da vitamina A. A prealbumina é sintetizada predominantemente por hepatócitos e também é expressa no plexo coroide, contribuindo para o tráfego de proteínas e hormônios entre os compartimentos do plasma e do líquido cefalorraquidiano. Sua biologia se cruza com a proteostase da via secretora, a renovação de proteínas extracelulares e a dinâmica de ligação a ligantes que influenciam a sinalização metabólica sistêmica. O enovelamento e a agregação desregulados do TTR estão associados a distúrbios de deposição amiloide, enquanto alterações na expressão ou na estabilidade podem embasar estudos sobre a função hepática, o manejo dos hormônios tireoidianos e mecanismos de mau enovelamento proteico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Prealbumin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TTR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TTR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TTR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Prealbumin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TTR para a investigação da sinalização de Prealbumin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TTR críticos para a função Prealbumin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TTR para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Prealbumin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Prealbumin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TTR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Prealbumin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Prealbumin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TTR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TTR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.