Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Prealbumin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401083
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Prealbumin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Prealbumin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Prealbumin Anticuerpo (E-1): sc-377517
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Prealbumin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401083 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El TTR humano codifica la prealbúmina (transtiretina), una proteína transportadora tetramérica secretada que transporta tiroxina (T4) y retinol mediante su unión a la proteína fijadora de retinol, contribuyendo a la distribución de hormonas endocrinas y a la homeostasis de la vitamina A. La prealbúmina se sintetiza predominantemente en los hepatocitos y también se expresa en el plexo coroideo, lo que contribuye al tráfico de proteínas y hormonas entre los compartimentos del plasma y el líquido cefalorraquídeo. Su biología se relaciona con la proteostasis de la vía secretora, el recambio de proteínas extracelulares y la dinámica de unión a ligandos que influye en la señalización metabólica sistémica. El plegamiento y la agregación desregulados de TTR se asocian con trastornos por depósito de amiloide, mientras que cambios en su expresión o estabilidad pueden aportar información en estudios de función hepática, manejo de la hormona tiroidea y mecanismos de mal plegamiento proteico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Prealbumin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TTR en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TTR junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TTR tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Prealbumin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TTR para la investigación de la señalización de Prealbumin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TTR críticos para la función de Prealbumin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TTR para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Prealbumin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Prealbumin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TTR. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Prealbumin (h) y el plásmido HDR Prealbumin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TTR para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TTR definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.