Pre-TCRα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417210-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pre-TCRαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Pre-TCRα (h) e o Plasmídeo Double Nickase Pre-TCRα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PTCRA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pre-TCRα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Pre-TCRα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTCRA codifica a pré–cadeia alfa do receptor de células T (pré-TCRα) humano, uma cadeia substituta invariável que se emparelha com o TCRβ para formar o complexo pré-TCR durante o desenvolvimento inicial dos timócitos. A sinalização do pré-TCRα coordena a seleção β, promovendo a sobrevivência, proliferação e diferenciação dos timócitos por meio de vias que incluem cascatas conduzidas por LCK/ZAP70, com atividade downstream de MAPK/ERK, NF-κB e PI3K-AKT. Esse checkpoint regula a exclusão alélica do TCRβ e a progressão dos estágios duplo-negativo para duplo-positivo, moldando o repertório emergente de células T. A expressão desregulada de PTCRA ou a sinalização do pré-TCR tem sido implicada em alterações no desenvolvimento linfoide e é frequentemente estudada no contexto de diferenciação aberrante da linhagem T e de programas de sinalização associados à leucemia.
Pre-TCRα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PTCRA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PTCRA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PTCRA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PTCRA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.