Pre-TCRα CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422473

개요

Ptcra는 마우스 pre–T 세포 수용체 알파(pre-TCRα)를 암호화하며, 이는 발달 중인 흉선세포에서 발현되는 pre-TCR 복합체의 필수 구성요소입니다. Pre-TCRα는 TCRβ와 짝을 이루어 신호전달 수용체를 형성하고 β-선택(β-selection)을 촉진함으로써 증식, 생존, 그리고 이중음성(double-negative) 단계에서 이중양성(double-positive) 단계로의 진행을 유도합니다. Pre-TCR 신호는 LCK/ZAP70 의존성 경로와 그 하위의 MAPK 및 PI3K–AKT 신호전달을 포함하여, 흉선세포 분화와 연관된 키나아제 연쇄반응과 전사 프로그램을 활성화합니다. PTCRA 관련 체크포인트가 비정상적으로 조절되면 T 세포 발달과 레퍼토리 형성이 교란될 수 있으며, 이는 마우스 모델에서 면역결핍과 T 세포 주도 병태생리를 연구하기 위한 기전적 접근 지점을 제공합니다.

Pre-TCRα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ptcra 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ptcra 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ptcra의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Pre-TCRα 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Pre-TCRα 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ptcra 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Pre-TCRα 기능에 중요한 Ptcra 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ptcra 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Pre-TCRα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Pre-TCRα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ptcra 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Pre-TCRα HDR 플라스미드 (m) 및 Pre-TCRα HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ptcra 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ptcra 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.