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PRDM16慢病毒激活颗粒(h) | sc-403464-LAC | 200 µl | $455.00 |
PRDM16 编码一种含 PR/SET 结构域的转录调控因子,可通过情境依赖性的转录激活与转录抑制,协调谱系命运决定与代谢相关基因程序。在脂肪与间充质细胞谱系中,PRDM16 通过与 PGC-1 家族成员及染色质修饰复合体等辅因子相互作用,紧密参与线粒体生物发生、氧化代谢以及产热基因网络的调控。在造血系统中,PRDM16 有助于干/祖细胞的维持与分化,体现其在染色质状态控制与发育性转录调控网络中的更广泛作用。PRDM16 表达失调或结构改变与异常分化及致癌性转录程序相关,因此成为癌症生物学、代谢研究与发育调控领域的重要研究对象。
PRDM16 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PRDM16 表达。
PRDM16 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PRDM16转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PRDM16表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PRDM16 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。