PRDM16 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403464-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRDM16O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRDM16 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRDM16 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRDM16. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRDM16 Anticorpo (174A2D): sc-517625
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRDM16 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403464-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRDM16 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403464-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM16 codifica um regulador transcricional com domínio PR/SET do tipo dedo de zinco, que integra o controle epigenético a programas de expressão gênica específicos de linhagem. É mais conhecido por coordenar decisões de destino de adipócitos, incluindo a adipogênese marrom e bege, por meio de interações com co-reguladores e da modulação de redes gênicas ligadas ao metabolismo mitocondrial e oxidativo. PRDM16 também contribui para estados transcricionais durante o desenvolvimento e em células-tronco/progenitoras, influenciando a diferenciação e a homeostase tecidual. A expressão desregulada ou rearranjos de PRDM16 têm sido associados a fenótipos metabólicos alterados e a programas transcricionais oncogênicos em determinados contextos hematológicos, tornando-o relevante para estudos mecanísticos focados em vias.
PRDM16 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRDM16 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRDM16. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRDM16. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRDM16 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.