PP2B-Aγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422385
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP2B-Aγ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP2B-Aγ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP2B-Aγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422385 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppp3cc codifica a subunidade catalítica gama da calcineurina (PP2B-Aγ), uma fosfatase de serina/treonina dependente de Ca2+/calmodulina que conecta sinais intracelulares de cálcio a programas de desfosforilação que controlam a transcrição e a dinâmica do citoesqueleto. A PP2B-Aγ contribui para redes de sinalização dependentes de cálcio, como a regulação de NFAT, a remodelação associada à atividade sináptica e a expressão gênica dependente de estímulos em diferentes tipos celulares excitáveis e relacionados ao sistema imune. Por meio da modulação dos estados de fosforilação em intermediários-chave de sinalização, a calcineurina influencia processos que incluem plasticidade neuronal, desenvolvimento e transições de estado celular. A atividade desregulada da via da calcineurina é amplamente investigada em contextos de neurobiologia e sinalização imune, oferecendo estruturas relevantes para doenças em estudos mecanísticos do controle transcricional dirigido por cálcio.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP2B-Aγ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppp3cc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppp3cc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppp3cc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP2B-Aγ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppp3cc para a investigação da sinalização de PP2B-Aγ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppp3cc críticos para a função PP2B-Aγ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppp3cc para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP2B-Aγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PP2B-Aγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppp3cc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP2B-Aγ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PP2B-Aγ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppp3cc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppp3cc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.