POU2F3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417495
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- POU2F3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico POU2F3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:POU2F3 Anticorpo (6D1): sc-293402
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
POU2F3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417495 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
POU2F3 codifica um fator de transcrição com domínio POU que regula programas de expressão gênica específicos de linhagem em células epiteliais, com papéis de destaque na diferenciação e na manutenção de estados especializados de células tuft/brush. Ao se ligar a motivos semelhantes ao octâmero e coordenar redes transcricionais, POU2F3 influencia a identidade epitelial, a sinalização associada à função sensorial e processos relacionados à barreira mucosa. A atividade alterada de POU2F3 tem sido associada à plasticidade de linhagem e a dependências transcricionais específicas de subtipos em certos cânceres derivados de epitélio, incluindo variantes de câncer de pulmão de pequenas células. Como regulador mestre, é frequentemente estudado no contexto do controle do destino celular mediado pela cromatina e da reorganização de circuitos de fatores de transcrição.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO POU2F3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene POU2F3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do POU2F3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do POU2F3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína POU2F3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de POU2F3 para a investigação da sinalização de POU2F3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) POU2F3 críticos para a função POU2F3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos POU2F3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo POU2F3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo POU2F3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus POU2F3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo POU2F3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR POU2F3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia POU2F3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo POU2F3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.