Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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POMC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437377
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- POMC O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico POMC, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTH/CLIP Anticorpo (F-3): sc-373878
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
POMC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) | sc-437377 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A proopiomelanocortina (POMC) é um pró-hormônio neuroendócrino precursor que é processado proteoliticamente em vários peptídeos bioativos, incluindo ACTH e melanocortinas, os quais coordenam a sinalização do eixo do estresse, o balanço energético, a pigmentação e a nocicepção. Nas vias hipotalâmicas e hipofisárias de rato, peptídeos derivados de POMC atuam por meio de receptores de melanocortina e integram sinais nutricionais e hormonais para regular o comportamento alimentar e a homeostase metabólica. A expressão de POMC é rigidamente controlada por programas transcricionais do desenvolvimento e responsivos a estímulos, e alterações no processamento ou na sinalização de POMC estão implicadas em fenótipos relacionados à obesidade, respostas desreguladas do eixo HPA e disfunção endócrina. Como um nó central na biossíntese de neuropeptídeos e na sinalização mediada por GPCRs, a POMC é amplamente utilizada para estudar a identidade de células neuroendócrinas, a maturação de peptídeos e a fisiologia sistêmica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO POMC (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína POMC.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de POMC, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função POMC
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo POMC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo POMC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo POMC Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR POMC (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.