Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PMS2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422324-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMS2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PMS2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase PMS2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pms2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PMS2 Anticorpo (B-3): sc-25315
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMS2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422324-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Pms2 do camundongo codifica a PMS2, um componente central do complexo MutLα com a MLH1, que coordena o reparo de incompatibilidades (mismatch) no DNA após erros de replicação. A PMS2 fornece atividade endonuclease que ajuda a iniciar as etapas de excisão e ressíntese, conectando o reconhecimento do mismatch ao reparo subsequente por meio de interações com PCNA, EXO1 e polimerases de DNA. Por meio desses processos, a PMS2 contribui para a estabilidade do genoma, a supressão da instabilidade de microssatélites e a manutenção da fidelidade do ciclo celular. A disfunção da PMS2 está associada a taxas elevadas de mutação e tem sido implicada em síndromes de predisposição ao câncer e em mecanismos mais amplos de doenças relacionadas ao reparo de DNA, tornando-a um alvo-chave para estudar mutagênese e respostas de checkpoint em modelos murinos.
PMS2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pms2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pms2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pms2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pms2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.