Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PMS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422324
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMS2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PMS2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PMS2 Anticorpo (B-3): sc-25315
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422324 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Pms2 de camundongo codifica a proteína PMS2, um componente central do complexo de reparo de incompatibilidades MutLα, formado com MLH1, que corrige incompatibilidades base–base e alças de inserção–deleção que surgem durante a replicação do DNA. A PMS2 contribui com atividade endonuclease que coordena as etapas de excisão e ressíntese, sustentando a estabilidade do genoma e a sinalização adequada de dano ao DNA. Por seu papel no reparo pós-replicativo e na manutenção da integridade de microssatélites, alterações na função de PMS2 estão associadas a taxas elevadas de mutação e a respostas desreguladas ao estresse replicativo. Em pesquisa, a perturbação de Pms2 é usada para modelar deficiência de reparo de incompatibilidades e para estudar o acúmulo de mutações, a interação entre vias de reparo do DNA e as respostas de checkpoint.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PMS2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pms2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pms2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pms2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PMS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pms2 para a investigação da sinalização de PMS2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pms2 críticos para a função PMS2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pms2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PMS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PMS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pms2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PMS2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PMS2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pms2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pms2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.