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PLC γ1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400472-LAC | 200 µl | $455.00 |
PLCG1 编码磷脂酶 C γ1(PLCγ1),这是一种位于受体近端的信号转导酶,可在受体酪氨酸激酶以及部分免疫受体下游,通过 SH2/SH3 介导的相互作用与磷酸化而被激活。PLCγ1 水解 PIP2 生成 IP3 和 DAG,从而启动细胞内 Ca2+ 动员与蛋白激酶 C(PKC)激活,协同调控细胞骨架重塑、迁移以及转录程序。该信号节点与 MAPK/ERK 和 PI3K 依赖性通路发生串联,并在特定情境下参与对增殖与存活的调控。多种疾病背景(包括癌症与免疫相关疾病)中均有 PLCG1 信号失调及突变的报道,因此它是研究受体驱动信号转导机制的重要靶点。
PLC γ1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PLCG1 表达。
PLC γ1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PLCG1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PLC γ1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PLCG1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。