PLC η2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409214
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PLC η2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PLC η2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PLC η2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409214 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PLCH2 codifica a fosfolipase C eta 2 (PLC η2), uma enzima específica para fosfoinositídeos que hidrolisa o PIP2 para gerar IP3 e diacilglicerol, acoplando assim a sinalização de lipídios de membrana à mobilização intracelular de Ca2+ e à ativação da proteína quinase C. Como moduladora do turnover de fosfoinositídeos, a PLC η2 contribui para o controlo dependente de Ca2+ da transdução de sinal, da remodelação do citoesqueleto e do tráfego vesicular em células humanas. A alteração da sinalização lipídica ligada à PLC é amplamente relevante para a desregulação da proliferação, diferenciação e respostas ao stress, tornando o PLCH2 um nó útil para investigar a reconfiguração de vias em fenótipos celulares associados a doenças. O estudo da PLC η2 pode ajudar a esclarecer como a dinâmica PIP2/IP3/DAG molda programas transcricionais a jusante e redes de efetores dependentes de cálcio.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PLC η2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PLCH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PLCH2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PLCH2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PLC η2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PLCH2 para a investigação da sinalização de PLC η2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PLCH2 críticos para a função PLC η2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PLCH2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PLC η2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PLC η2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PLCH2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PLC η2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PLC η2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PLCH2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PLCH2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.