Placental lactogen II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422277

Visão geral

Prl3b1 codifica o lactogénio placentário II do rato, uma citocina da família prolactina/hormona do crescimento expressa predominantemente por linhagens de trofoblasto durante a gestação. O lactogénio placentário II apoia as adaptações materno-fetais ao modular processos endócrinos e metabólicos, incluindo a sinalização via recetor de prolactina (PRLR), com programas transcricionais a jusante JAK2–STAT5 que influenciam o metabolismo de nutrientes e a remodelação de tecidos maternos. Na placenta, a atividade de Prl3b1 está associada à diferenciação do trofoblasto e à regulação da fisiologia materna, tornando-o relevante para o estudo do desenvolvimento placentário e do diálogo endócrino. A desregulação da sinalização do lactogénio placentário tem sido associada a alterações do crescimento fetal e a complicações da gravidez em sistemas modelo, posicionando Prl3b1 como um locus útil para investigações mecanísticas da disfunção placentária.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Placental lactogen II (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prl3b1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prl3b1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prl3b1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Placental lactogen II.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prl3b1 para a investigação da sinalização de Placental lactogen II, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prl3b1 críticos para a função Placental lactogen II
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prl3b1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Placental lactogen II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Placental lactogen II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prl3b1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Placental lactogen II Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Placental lactogen II (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prl3b1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prl3b1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.