PKR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (rabbit): sc-437324
- alvos específicos: rabbit
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PKR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (rabbit) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PKR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PKR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (rabbit) | sc-437324 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PKR (EIF2AK2) é uma quinase de serina/treonina induzível por interferon que reconhece RNA de dupla fita e coordena as defesas antivirais inatas. Após a ativação, a PKR fosforila o eIF2α para suprimir a tradução dependente de cap, moldando as respostas celulares ao estresse e modulando programas de sinalização de NF-κB e IRF. A atividade da PKR influencia a apoptose, desfechos relacionados ao inflamassoma e a comunicação cruzada com vias de MAPK, conectando o reconhecimento de patógenos a um controle mais amplo da expressão gênica. A desregulação da sinalização da PKR tem sido associada à inflamação crônica, maior suscetibilidade a vírus e alterações na proteostase relevantes para modelos de neurodegeneração e estresse metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PKR (rabbit) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rabbit. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PKR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de PKR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função PKR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PKR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (rabbit) e pelo PKR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (rabbit2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PKR Plasmídeo HDR (rabbit) e o Plasmídeo HDR PKR (rabbit2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.