PIWIL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402211-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PIWIL2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PIWIL2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PIWIL2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PIWIL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PIWIL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402211-NIC | 20 µg | $410.00 |
PIWIL2 (silenciamento gênico mediado por RNA tipo PIWI 2) é uma proteína Argonauta da subfamília PIWI que se liga a piRNAs para regular a estabilidade de RNAs e estados epigenéticos, com papéis de destaque no desenvolvimento da linhagem germinativa e na manutenção da integridade do genoma. Participa da repressão de transposons mediada pela via de piRNA, do silenciamento gênico pós-transcricional e da regulação associada à cromatina, limitando assim a mobilização de elementos transponíveis e o dano ao DNA. A expressão aberrante de PIWIL2 foi relatada em múltiplos contextos tumorais e é frequentemente estudada em relação a programas com características de células-tronco, controle alterado do ciclo celular e redes de pequenos RNAs desreguladas. Assim, PIWIL2 é relevante para investigar mecanismos de silenciamento guiado por RNA, regulação epigenética e vias de vigilância do genoma em células humanas.
PIWIL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PIWIL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PIWIL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PIWIL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PIWIL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.