非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PI 3-kinase p110β 抗体 (C-8): sc-376641. K-562 (A), RAW 264. 7 (B), AMJ2-C8 (C), LADMAC (D) 和 RBL-1 (E) 全细胞裂解液及大鼠小脑组织提取物 (F) 中 PI 3- 激酶 p110β 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400541
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PI 3-kinase p110β基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PI 3-kinase p110β: sc-376641，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400541 | 20 µg | $397.00 |
概述
PIK3CB 编码 I 类磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）的 p110β 催化亚基，该激酶可将 PIP2 磷酸化生成 PIP3，并将信号向下游的 AKT–mTOR 及其他效应节点传递。PI3K p110β 在受体酪氨酸激酶（RTK）和 G 蛋白偶联受体（GPCR）启动的信号传导中发挥重要作用，整合并调控细胞增殖、生存、代谢、细胞骨架动力学以及囊泡运输等过程的多种信号输入。在人体细胞中，PI3K 通路活性异常常与致癌信号、治疗耐受机制以及异常的免疫与炎症反应相关。PIK3CB 的功能也与胰岛素/IGF 信号及细胞运动程序密切相关，因此它是通路绘制与功能基因组学研究中被广泛关注的关键节点。
PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PIK3CB基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PIK3CB基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PIK3CB开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PI 3-kinase p110β蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建PIK3CB缺失的细胞模型，用于PI 3-kinase p110β信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PI 3-kinase p110β 功能至关重要的 PIK3CB 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 PIK3CB 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PIK3CB 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PI 3-kinase p110β HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 PI 3-kinase p110β HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PIK3CB同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PIK3CB靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。